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上海藍(lán)基生物科技有限公司
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雜交瘤細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的操作方法
上海藍(lán)基生物科技有限公司
http://www.bioboke.com/
雜交瘤細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的操作方法
1.材料
大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞株瘤雜交瘤細(xì)胞株
(1)經(jīng)高壓**的降植烷。
(2)Balb/c鼠:5~8周齡。
(3)雜交瘤細(xì)胞:取對數(shù)生長期的細(xì)胞。
(4)RPMI—1640培養(yǎng)液
(5)新生牛血清
2.操作方法
(1)于小鼠腹腔注射0.5ml降植烷,注射后1~9周內(nèi)種植細(xì)胞。
(2)收取對數(shù)生長期的雜交瘤細(xì)胞,用5%FCS—1640液洗滌一次,1000r/min離心10min。
(3)取樣,用臺盼蘭染色,計(jì)活細(xì)胞數(shù),重新用5%FCS—1640液配成1.0×107細(xì)胞/ml的懸液。
(4)給注射了降植烷的小白鼠接種雜交瘤細(xì)胞,每只腹腔注射1ml(含1.0×107個(gè)細(xì)胞/ml)。
(5)接種后10天左右時(shí)間腫瘤體積*大,此時(shí)可由腹腔抽取腹水,每隔1~3天取1次,可取10次。血清可由腋下動脈或心臟采血后分離。
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