細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒: 本試劑盒通常應(yīng)用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞的細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)。如果用于組織的細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè),則必須把組織消化成單細(xì)胞狀態(tài),才可以進(jìn)行檢測(cè)。
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),由于胞漿和染色質(zhì)濃縮、核碎裂,產(chǎn)生凋亡小體,使細(xì)胞的光散射性質(zhì)發(fā)生變化。在細(xì)胞凋亡的早期,細(xì)胞對(duì)前向角光散射的能力顯著降低,對(duì)側(cè)向光散射的能力增加或沒(méi)有變化。在細(xì)胞凋亡的晚期,前向和側(cè)向光散射的信號(hào)均降低。因此可通過(guò)流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞光散射的變化觀察細(xì)胞凋亡情況。
碘化丙啶(Propidium,簡(jiǎn)稱PI)是一種雙鏈DNA的熒光染料。碘化丙啶和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生熒光,并且熒光強(qiáng)度和雙鏈DNA的含量成正比。細(xì)胞內(nèi)的DNA被碘化丙啶染色后,可以用流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞進(jìn)行DNA含量測(cè)定,然后根據(jù)DNA含量的分布情況,可以進(jìn)行細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡分析。
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒碘化丙啶染色后,假設(shè)G0/G1期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1,那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度的理論值為2,正在進(jìn)行DNA復(fù)制的S期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1-2之間。凋亡細(xì)胞由于細(xì)胞核發(fā)生濃縮以及發(fā)生DNA片段化(DNA fragmentation)導(dǎo)致部分基因組DNA片斷在染色過(guò)程中丟失,因此凋亡細(xì)胞碘化丙啶染色后呈現(xiàn)明顯的弱染,即熒光強(qiáng)度小于1,在流式檢測(cè)的熒光圖上出現(xiàn)所謂的sub-G1峰,即凋亡細(xì)胞峰。
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